Spezifische Bestimmung der Lebendzellzahl
Der Flow VIT® Lactobacillus spp. Testkit ermöglicht die schnelle und präzise Analyse von Lactobacillus spp. in Probiotika. Durch die innovative Kombination von Fluoreszenz-In-Situ-Hybridisierung (FISH) und Durchflusszytometrie bietet dieser Testkit eine kultivierungsunabhängige und absolute Quantifizierung lebender Zellen innerhalb kürzester Zeit. Dank dieser fortschrittlichen Technologie können die Lebensfähigkeit und die Menge des probiotischen Bakteriums selbst in komplexen probiotischen Mischungen schnell, automatisiert und hochspezifisch bestimmt werden.
Ihre Vorteile
Die Flow VIT® Testkits ermöglichen die schnelle Quantifizierung lebender Bakterienzellen direkt aus der Probe, ohne die Verzögerungen und Selektionsverzerrungen klassischer Kultivierungsmethoden. Durch den Einsatz von Fluorescence in situ Hybridization (FISH) in Kombination mit Durchflusszytometrie erfolgt die Identifikation und Quantifizierung von Mikroorganismen innerhalb von wenigen Stunden, während herkömmliche Kultivierungsverfahren oft mehrere Tage erfordern.
Ein entscheidender Vorteil von Flow VIT® ist die Erfassung von viable but non-culturable (VBNC) Zellen, also Bakterien, die metabolisch aktiv, aber nicht kultivierbar sind. In herkömmlichen Plattenzähltests bleiben diese Organismen unentdeckt, obwohl sie in probiotischen Produkten und im menschlichen Darm eine wesentliche Rolle für die Wirksamkeit spielen. Da Flow VIT® die rRNA als Zielstelle für seine VIT® Gensonden nutzt – ein Marker für aktive Proteinsynthese – werden auch VBNC-Zellen zuverlässig quantifiziert. Dies führt zu einer realistischen Einschätzung der tatsächlichen probiotischen Lebensfähigkeit und verhindert die systematische Unterschätzung wie sie bei kultivierungsabhängigen Methoden vorkommt.
Durch diese kultivierungsunabhängige Methodik liefert Flow VIT® eine genaue, schnelle und umfassende Analyse der Viabilität probiotischer Mikroorganismen – ein entscheidender Vorteil in der Produktentwicklung, Stabilitätsprüfung und Qualitätskontrolle.
Die Flow VIT® Technologie ist automatisierbar und liefert eindeutige, objektive und reproduzierbare Ergebnisse. Der kombinierte Einsatz von VIT® Gensonden und hochsensitiver Durchflusszytometrie ermöglicht eine standardisierte und objektive Quantifizierung. Die Software-gestützte Analyse erlaubt die automatische Auswertung großer Probenserien. Dies macht Flow VIT® ideal für Qualitätskontrollen in der industriellen Produktion.
Im Gegensatz zur klassischen koloniebildenden Einheiten (CFU)-Bestimmung, die von der Kultivierbarkeit der Bakterien abhängig ist, erfasst Flow VIT® die tatsächliche Anzahl lebender Zellen direkt in der Probe. Die quantitativen Ergebnisse werden in lebenden Zellen pro Milliliter (Zellen/mL) angegeben, was eine genaue Beurteilung der Viabilität und Stabilität ermöglicht.
Flow VIT® erfasst nur lebende Zellen. Somit wird sichergestellt, dass ausschließlich metabolisch aktive und intakte Mikroorganismen detektiert und quantifiziert werden. Abgestorbene Zellen werden nicht erfasst. Somit wird eine präzise Unterscheidung zwischen lebenden und toten Zellen ermöglicht.
Im Gegensatz dazu basieren PCR und andere molekularbiologische Methoden auf der Detektion von DNA, die selbst aus abgestorbenen oder lysierten Zellen noch lange nachweisbar bleibt. Dies führt zu einer nur ungenauen Bestimmung der mikrobiellen Zellzahl, da DNA-basierte Verfahren nicht zwischen lebenden, toten oder fragmentierten Zellresten unterscheiden können. Besonders bei probiotischen Produkten oder stabilitätskritischen Fermentationsprozessen kann dies zu einer falschen Bewertung der tatsächlichen Viabilität und Produktqualität führen.
Durch die FISH-basierte, zellselektive Quantifizierung bietet Flow VIT® somit eine überlegene Alternative zu DNA-basierten Methoden, indem es ausschließlich lebenden probiotische Mikroorganismen erfasst und eine damit eine realistische Zählung der lebenden mikrobiellen Zellen ermöglicht.
Die Flow VIT® Testkits verwenden hochselektive, speziell entwickelte VIT® Gensonden, die eine zielgenaue Identifikation einzelner Bakterien oder ganzer Gruppen innerhalb einer Probe ermöglichen. Dies stellt sicher, dass nur die gewünschten probiotischen Bakterien quantifiziert werden.
Die Kombination aus FISH und Durchflusszytometrie erlaubt eine Detektion selbst in komplexen industriellen Probematrices, wie Kapseln, Pulvern oder fermentierten Produkten. Durch die VIT® Optimierung können auch niedrige Zellzahlen in heterogenen Formulierungen sicher bestimmt werden.
Die hohe Empfindlichkeit der Methode ermöglicht zudem eine präzise Überwachung von probiotischen Populationen während des gesamten Herstellungsprozesses, einschließlich Fermentation, Stabilitätsprüfung und Endproduktkontrolle.
Flow VIT® wurde speziell für den industriellen Einsatz in der probiotischen Qualitätskontrolle, Produktentwicklung und Forschung entwickelt. Die Vorteile umfassen:
- Chargenfreigabe mit hoher Reproduzierbarkeit: Ergebnisse in wenigen Stunden, statt tagelanger Wartezeit auf Kultivierungsergebnisse
- Verlässliche Stabilitätsprüfungen: Präzise Viabilitätsanalyse während der gesamten Haltbarkeitsdauer
- Optimierung von Fermentationsprozessen: Einblicke in mikrobielle Dynamiken
- Einhaltung regulatorischer Anforderungen: Spezifische Quantifizierung und Identifikation für exakte Deklarationen
Produktspezifikationen
| Nachweis von | Lactobacillus spp. |
| Proben, die u.a. untersucht werden können | Lyophilisate und Fertigprodukte (z.B. Tabletten, Kapseln) |
| Technologie | Flow VIT® |
| Auswertung | mittels Durchflusszytometer |
| Art der Analyse | direkter, quantitativer Nachweis |
| Zusatzleistungen | automatischer PDF-Report |
| Dauer der Auswertung | 2 Minuten pro Probe |
| Lieferumfang | Analysereagenzien, Produkthandbuch |
| Packungsgröße | 50 Analysen |
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Implementierung
Die Implementierung der Flow VIT® Technologie ist benutzerfreundlich und robust. Die Testkits sind einfach anzuwenden, lassen sich ohne spezielles Vorwissen in den Laboralltag integrieren und sind mit gängigen Durchflusszytometern kompatibel. Der automatisierte Workflow reduziert den manuellen Aufwand und minimiert Fehlerquellen.
Vergleich mit anderen Technologien
Im Vergleich zu konventionellen, kultivierungsbasierten Methoden ermöglicht Flow VIT® eine schnellere und leistungsfähigere Analyse von Lactobacillus acidophilus. Selbst nicht kultivierbare, aber lebensfähige Zellen (VBNC) können identifiziert und quantifiziert werden. Im Vergleich zu anderen molekularbiologischen Methoden besticht Flow VIT® durch seine Fähigkeit, nur lebende Zellen nachzuweisen und zuverlässig – auch in komplexen Proben – zu quantifizieren. Da keine Enzyme verwendet werden, ist die Methode äußerst robust und zuverlässig. Flow VIT® ist eine direkte Methode, welche die Zellen hochspezifisch anfärbt und direkt mittels Durchflusszytometrie automatisiert auswertet.